KKK tsentrifugaalfiltriseadmete kohta

Q1. Eraldada on vaja erineva molekulmassiga valke, siis kui suurt vahet peaksid valkude molekulmassid vajama?

V: Kahe valgu suurus peab erinema 10 korda või rohkem.

 

Q2. Saab tsentrifuugidaAlfiltriseadmed peavad olema steriliseeritud ja leelispesukindlad?

V: Seda saab steriliseerida 75% etanooli vesilahusega ja membraan talub 0.1-0,5N naatriumhüdroksiidi leelispesu.

 

Q3. Kuidas toimida, kui valk sadestub kontsentreerimisel?

V: Kui valk kontsentreeritakse liiga kiiresti või liiga kontsentreeritud, võib see põhjustada valgu sadestumist ja valgu lõplik kontsentratsioon pärast kontsentreerimist ei tohiks olla liiga kõrge; Valgud, mis on tundlikud kontsentratsioonikiiruse suhtes ja kipuvad sadestuma, soovitatud parendusmeetodid:

Vähendage tsentrifugaalkiirust

Kasutage kõrgema molekulmassi piirväärtusega ultrafiltreerimismembraani

Puhuge ja imege kontsentreeritud katseklaasi ning seejärel tsentrifuugige

 

Q4. Mis on võimalik põhjus, mikstsentrifugaalfiltriseadmedei saa tsentrifuugida?

V: Kui ultrafiltratsioonitoru ei saa tsentrifuugida, võite esialgseks tsentrifuugimiseks kasutada umbes 20-protsendilist etanooli vesilahust, kuna ultrafiltratsioonimembraan on täiesti kuiv, membraani pind on nõrgalt hüdrofoobne ja voolu saab taastada pärast infiltratsiooni madalal temperatuuril. pindpinevuslahusti.

 

Q5. Tsentrifugaalfiltriseadmete õiged kasutusviisid ja ladustamine

V: Tsentrifugaalfiltriseadmeid tuleks enne kasutamist tsentrifuugida puhastatud veega, et kontrollida nende terviklikkust. Pärast iga kasutamist tuleb seda hoida märjas olekus, et vältida membraani kuivamist.

 

Q6. Kuidas eemaldavad tsentrifugaalfiltriseadmed endotoksiini?

V: Meie pakutud tsentrifugaalfiltriseadmeid ei ole endotoksiinidega töödeldud ja kuna endotoksiine leidub looduses laialdaselt, saab endotoksiine vajavaid proove enne katset eelnevalt puhastada 0,5N naatriumhüdroksiidiga ja seejärel pesta RO vesi, et eemaldada suurem osa endotoksiinist.

 

Q7. Kui kontsentreeritud valku kasutatakse allavoolu analüüsiks, leitakse, et tegemist on häiretega, mis on põhjus?

V: Tsentrifugaalfiltriseadmeid saab eelnevalt pesta puhverlahuse või puhastatud veega. Kui segamine püsib, peske 0,1 N naatriumhüdroksiidiga ja seejärel puhastatud veega.

 

Q8. It leitakse, et pärast kontsentreerimist ei ole kontsentraadis sihtvalku. Millised on võimalikud põhjused?

V: 1) Valgu esialgne kontsentratsioon ei tohiks olla liiga madal, kui kontsentratsioon on liiga madal, ei pruugi membraani säilitada.

2) Valige sobiv membraani pooride suurus. Filtritoru tsentrifugaalkontsentratsioon kuulub ummikfiltreerimisele ja membraani pooride suurus on tavaliselt sihtvalgust vähem kui 2 korda või rohkem.

3) Valige õige tsentrifugaalkiirus

4) kas sihtvalk sadestub

 

Q9. Tsentrifugaalfiltriseadmete passiveerimine

V: Tsentrifugaalfiltriseadmete pinna passiveerimise eeltöötlus võib vähendada valgu adsorptsioonikadu membraani pinnal, enamikul juhtudel võib kolonni eeltöötlemine enne lahjendatud valgulahuse kontsentreerimist parandada taastumist, kuna lahus võib täita eksponeeritud tühjad valgu adsorptsioonikohad membraanil ja pinnal, passiveerimismeetodiks on kolonni eelleotamine suure koguse passiveerimislahusega üle 1 tunni, kolonni loputamine põhjalikult destilleeritud veega ja kolonni tsentrifuugimine üks kord destilleeritud veega. membraanile jäänud passiveerimislahuse täielikuks eemaldamiseks olge ettevaatlik, et membraan pärast passiveerimist ära ei kuivaks, kui soovite seda edaspidiseks kasutamiseks alles hoida, peate membraani märjana hoidmiseks lisama steriilset destilleeritud vett., võtke ühendust meie insenerid levinumate passiveerimislahenduste jaoks.

 

Q10. Kas ultrafiltratsioonimembraan filtreerib molekule hierarhiliselt?

A: Generally speaking, if the dead-end filtration method is used, it is difficult to accurately remove small molecules among several large molecules by ultrafiltration method. This is because the membrane is a porous network structure, and its filtration mechanism is based on retention rather than passage, such as, the cut off rate of molecules larger than 100kd is >95 protsenti, kui kasutada 100 kd ultrafiltratsioonimembraani, aga membraani pooride suurusest väiksemad molekulid ei läbi membraani täielikult vabalt. 67 kd molekulaarne retentsioonimäär on üle 70 protsendi ja 43 kd valk on samuti üle 40 protsendi ära lõigatud, erinevad komponendid segalahuses läbivad membraani mitte nii lihtsalt ja lihtsalt kui ühekomponendiline lahus. , kui soovite eraldada kaks makromolekuli, peaks nende molekulmassi erinevus olema kaheksa või enam korda.

 

Q11. Kuidas eraldada tõhusalt suuri ja väikeseid molekule ultrafiltrimise teel?

V: Protsessi vajaduste tõttu eemaldatakse makromolekulides olevad lisandid või eemaldatakse makromolekulidest väikesed molekulid, see on tootmisel normaalne. Väga vajalik on valida sobiv membraani pooride suurus, filtreerimismeetod ja töötingimused. Üldiselt, kui membraani MWCO spetsifikatsioon valitakse kahe valgu vahel, on võimalik saavutada suhteliselt ideaalne eraldamine. Kui valgulahus on suhteliselt lahjendatud, aitab paremaid tulemusi saavutada ka madala rõhu all töötamine. Parema eraldusefekti saavutamiseks valige tangentsiaalne voolufiltreerimine ja tehke mitu diafiltratsiooni.