Juhttehnoloogia võimaldab teil õppida lihtsat ja tõhusat magestamise ja kontsentreerimise meetodit
Valgud tuleb pärast eraldamist ja puhastamist sageli soolast vabastada ning need soolad saadakse peamiselt erinevatest elusorganismide ioonidest (nt naatriumioonid, kaaliumioonid, kloriidiioonid jne), samuti ekstraktides sisalduvatest puhversooladest, sooladest eluendid ja teatud katsetes kasutatud denaturantide soolakomponendid. Soola kõrge kontsentratsioon võib mõjutada valkude aktiivsust ja stabiilsust, samuti nende koostoimeid teiste molekulidega, tekitades häirivaid signaale või vähendades mõõtmiste täpsust järgmistes analüütilistes meetodites, nagu elektroforees, massispektromeetria ja kristallograafilised uuringud. Seetõttu on pärast eraldamist väga vajalik puhastatud valkude soolatustamine ning sageli kasutatavad peamised soola eemaldamise meetodid on membraan (dialüüs ja ultrafiltratsioon) ja geelfiltratsioonkromatograafia. Lisaks saab mõnel juhul magestada ka lahjendamise teel.
Dialüüsi magestamine on pika tsükli ja suure hulga asendusvedeliku vajaduse tõttu selle kasutamist oluliselt piiratud ja seda kasutatakse tööstuses vähem, kuid peamiselt kasutatakse seda osaliselt laboris, samuti asendatakse labor järk-järgult ultrafiltratsioonitorudega. /ultrafiltratsiooni tass.
Peamine membraanide eraldamise tehnoloogia, mida kasutatakse valkude soolamise ja kontsentreerimise protsessis, on ultrafiltreerimine. Ultrafiltratsioon on membraanide eraldamise tehnoloogia, millel on kõrge efektiivsus, madal energiatarve, faasimuutus, keemiliste reaktiivide lisamine, lihtne töö, kerged tingimused, võime paremini säilitada bioloogiliste makromolekulide aktiivsust, kõrge taastumiskiirus ja muud eelised. , ning selle kasutamisel valkude eraldamisel ja puhastamisel on ainulaadsed eelised.
Ultrafiltratsioon on membraanfiltrimise meetod, mis kasutab eralduskeskkonnana poorset membraani ja tugineb membraani kahe külje vahelisele rõhuerinevusele kui liikumapaneva jõuna, et eraldada lahuses erineva molekulmassiga aineid, mängides seega rolli magestamises, kontsentreerimises. ja puhastamine. Tegemist on viimastel aastatel välja töötatud uudse meetodiga, mis sobib kõige paremini bioloogiliste makromolekulide, eriti valkude ja ensüümide kontsentreerimiseks või magestamiseks. Ultrafiltrimise rakendamise võti on membraani valik, membraani erinevad tüübid ja spetsifikatsioonid, millel on erinevus vee voolukiiruses, molekulmassi piirväärtuses ja muudes parameetrites, see tuleb valida vastavalt asjakohastele töövajadustele. Lisaks mõjutavad ultrafiltrimise mõju teatud määral ultrafiltreerimisseadme vorm, lahustunud aine koostis ja omadused, lahuse kontsentratsioon jne.
Ultrafiltratsioonitehnoloogia rakendamist valkude soola eemaldamiseks ja kontsentreerimiseks valkude puhastusprotsessis iseloomustab selle sobivus suurte vedelike koguste töötlemiseks vahemikus mõnesajast kuni mõne tuhande liitrini, mille eeliseks on töö lihtsus, aja kokkuhoid. ja kõrge valgu taastumise määr. Ultrafiltreerimismeetod on küpsenud ultrafiltratsioonitorudest laboratoorseks mikromahuliseks töötlemiseks, ultrafiltratsioonitopsidest väikesemahuliseks töötlemiseks ja ultrafiltreerimissüsteemidest tööstuslikuks kasutamiseks.
Ultrafiltreerimine jaguneb otserõhu ultrafiltreerimiseks ja tangentsiaalseks voolufiltreerimiseks ning praegu kasutatakse tangentsiaalset voolufiltrit peamiselt tööstuses, mida kasutatakse laialdaselt magestamises ja puhvri asendamises.
Järgnevalt on toodud näide Guidling Technology ultrafiltratsioonimembraanikassettide kasutamisest valkude magestamisel ja kontsentreerimisel.
500 ml PEG-modifitseeritud kasvuhormooni lahuse kontsentratsiooniga 0,2 mg/ml soola eemaldamiseks ja kontsentreerimiseks kasutasime {{0}},11 ㎡ 10 kd pooride suurusega membraanikassetti (G01100010K). Ultrafiltreerimisprotsessi ajal uuriti magestamise kiirust, valgu taastumise kiirust, membraanivoolu rikke seisundit ja veevoolu taastumise kiirust.
Enne ja pärast kasutamist testisime membraanikasseti veevoogu eraldi ja membraanikassettide taastumiskiirus saavutas 98% eeldusel, et säilib sama etteandekiirus, toiterõhk ja tagasivoolurõhk.
Kogu protsess töötles kokku 2 liitrit materjali ja võttis aega 40min, 0-5min oli kontsentreerimisprotsess, 5-35min oli vedelikuvahetusprotsess ja 35-40min oli ülekontsentratsiooniprotsess. Kogu ultrafiltrimisprotsessi jooksul stabiliseeriti TMP vahemikus 0.{7}},8 baari, etteandekiirus oli konstantne ja keskmine materjalivoog oli 27 LMH.
2L materjali kontsentreeritud vedelik vahetab 60 ml, umbes 33 korda kontsentreeritud, magestamise määr ulatub 99% -ni, taaskasutamise määr ulatub 80% -ni, pärast pesemist suureneb vedeliku kogus 50 ml, kogusaagis 88%, tööstuslik tootmine vastavalt torujuhtme arvutuste surnud maht, nii palju kui võimalik, et suurendada ülemise pesu kordade arvu, üldine pealmine pesu 3 korda saab täielikult taastada.
Guidling Technology membraanikassetid on valmistatud meditsiinilise kvaliteediga inertsest materjalist, millel on tugev korrosioonikindlus ja mis taluvad tugevat leelispuhastust; automatiseeritud tootmisprotsessi kasutamine tagab toote järjepidevuse ja kvaliteedi usaldusväärsuse, suurema mehaanilise tugevuse, vasturõhukindluse ja korduva loputamise; sellel on ülihüdrofiilsus, mis võib anda membraanile suurema voolu ja madalama valgu adsorptsiooni; meil on ka optimeeritud voolukanali disain väiksema rõhukaoga, mis hõlbustab materjali ülekandmist ja lühendab oluliselt filtreerimisaega.
Meie membraanikassetid on saadaval laias valikus pooride suurusega 1 kd kuni 1000 kd. Neist 1-10kd ultrafiltratsioonimembraanikassette saab kasutada magestamise ja pürogeeni eemaldamise jaoks; 30 kd ultrafiltratsioonimembraanikassette saab kasutada monoklonaalsete antikehade kontsentreerimiseks ja puhvri asendamiseks; samal ajal saab meie õõneskiudtooteid kasutada ka bioloogiliste ainete kontsentreerimiseks ja asendamiseks, pooride suurusega 100 kd, 300 kd ja 500 kd, mida kasutatakse peamiselt paljudes rakendustes vaktsiinitoodetes.
Guidling Technology on riiklik kõrgtehnoloogiline ettevõte, mis keskendub biofarmatseutikatele, rakukultuurile, biomeditsiini puhastamisele ja kontsentreerimisele, diagnostikale ja tööstuslikele vedelikele. Oleme edukalt välja töötanud tsentrifugaalfiltriseadmed, ultrafiltreerimis- ja mikrofiltreerimiskassetid, viirusfiltrid, TFF-süsteemid, sügavusfiltrid, õõneskiud jne. Mis vastavad täielikult biofarmatseutiliste preparaatide, rakukultuuri jne rakendusstsenaariumidele. Meie membraane ja membraanfiltreid kasutatakse laialdaselt eelfiltreerimise, mikrofiltreerimise, ultrafiltratsiooni ja nanofiltratsiooni kontsentreerimiseks, ekstraheerimiseks ja eraldamiseks. Meie paljud tootesarjad, alates väikesest ühekordselt kasutatavast laboratoorsest filtreerimisest kuni tootmise filtreerimissüsteemide, steriilsuse testimise, kääritamise, rakukultuuri ja muuni, vastavad testimise ja tootmise vajadustele. Guidling Technology ootab teiega koostööd!
